Perbezaan Utama - HPLC vs LCMS
Mari kita perhatikan dahulu makna HPLC dan LCMS sebelum menganalisis perbezaan antara HPLC dan LCMS. Kromatografi adalah teknik pemisahan dalam analisis kimia di mana konstituen sampel dipisahkan semasa melalui media kromatografi. Ini juga melibatkan interaksi dengan sampel, fasa pegun, dan fasa bergerak. HPLC bermaksud Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi, dan ia digunakan sebagai kaedah kromatografi cair dalam kimia analisis. Kombinasi Kromatografi Cecair dan Spektroskopi Massa (LCMS) telah dikembangkan untuk analisis kuantitatif biomolekul terpilih dan ini adalah prosedur pengujian yang sangat sensitif, tepat, dan spesifik berbanding dengan HPLC. Ini adalah perbezaan utama antara HPLC dan LCMC. Artikel ini akan memperkenalkan anda kepada HPLC dan LCMC yang menangani analisis kimia dan membincangkan perbezaan antara HPLC dan LCMS.
Apa itu HPLC?
Kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) adalah teknik pemisahan yang popular dalam kimia analitik. Ia digunakan terutamanya untuk memisahkan komponen, mengenal pasti dan mengukur setiap komponen dalam campuran. Sebelumnya, kaedah ini dikenali sebagai kromatografi cecair tekanan tinggi kerana bergantung pada pam untuk mengalirkan pelarut cecair bertekanan yang terdiri daripada campuran sampel melalui lajur yang dibungkus dengan bahan penjerap padat. Setiap konstituen dalam campuran sampel berinteraksi secara berbeza dengan bahan penjerap pepejal, yang menghasilkan kadar aliran yang berbeza untuk konstituen yang berbeza. Ini boleh menyebabkan pemisahan konstituen ketika mengalir keluar lajur HPLC.
HPLC telah digunakan untuk berbagai aplikasi seperti analisis kadar vitamin D dalam darah, penggunaan ubat-ubatan haram atlet dengan mengesan sisa ubat dalam air kencing mereka, menyusun komponen-komponen sampel biologi yang kompleks untuk tujuan penyelidikan dan analisis dan pembuatan farmasi.
Apa itu LCMS?
Kromatografi cecair - spektrometri massa (LCMS) adalah teknik analitik yang menggabungkan kebolehan pemisahan fizikal kromatografi cecair dengan kemampuan analisis jisim spektrometri jisim (MS). Kromatografi cecair adalah teknik pemisahan, dan spektrometri jisim digunakan untuk menganalisis nisbah jisim-ke-muatan zarah-zarah bermuatan. Pemisahan fizikal biasanya dicapai dengan HPLC dan sebagai alternatif, LCMS juga dikenali sebagai HPLC-MS. LCMS adalah teknik analisis dominan yang mempunyai ketepatan, kepekaan, dan kekhususan yang sangat tinggi dibandingkan dengan HPLC. Oleh itu, ia berguna dalam banyak aplikasi seperti tujuan penyelidikan, analisis ubat, analisis makanan, dan lain-lain. LCMS terutama digunakan untuk memisahkan, untuk mengesan, mengenal pasti dan mengukur sifat biokimia sampel tertentu dengan adanya campuran kimia yang kompleks.
Apakah perbezaan antara HPLC dan LCMC?
Akronim dan definisi HPLC dan LCMC
HPLC: HPLC bermaksud Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi. Ini adalah teknik pemisahan yang terutama digunakan untuk memisahkan komponen, mengenal pasti dan mengukur setiap komponen dalam campuran.
LCMS: LCMS bermaksud Kromatografi Cecair dan Spektrometri Massa. Ini adalah teknik analitik yang menggabungkan kebolehan pemisahan fizikal kromatografi cecair dengan kemampuan analisis jisim spektrometri jisim (MS).
Ciri HPLC dan LCMC
Pengelasan
HPLC: Ini hanya kaedah Kromatografi Cecair.
LCMS: Ini adalah gabungan kaedah Kromatografi Cecair dan kaedah Spektrometri Massa.
Kecekapan
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang cekap dan lebih perlahan.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS adalah cekap dan lebih pantas.
Kepekaan
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang sensitif.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS lebih sensitif.
Kekhususan
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang spesifik.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS lebih spesifik.
Ketepatan
HPLC: HPLC memberikan hasil yang kurang tepat daripada LCMS untuk penentuan sebilangan bahan kimia.
LCMS: LCMS memberikan hasil yang lebih tepat daripada HPLC untuk penentuan sebilangan bahan kimia.
Komponen
HPLC: HPLC boleh dianggap sebagai komponen LCMS.
LCMS: LCMS tidak boleh dianggap sebagai komponen HPLC.
Sumber Ion
HPLC: Sumber ion tidak wujud dalam instrumen HPLC.
LCMS: Sumber ion terdapat dalam instrumen LCMS.
Permohonan
HPLC: Ion, polimer, molekul organik, dan biomolekul dapat dianalisis menggunakan HPLC.
LCMS: Molekul organik dan biomolekul dapat dianalisis. Berbeza dengan HPLC, LCMS dapat digunakan untuk memeriksa campuran yang belum selesai sepenuhnya.
Operasi
HPLC: Gambar rajah instrumen HPLC diberikan pada gambar 1, dan biasanya merangkumi autosampler, pam, dan alat pengesan. Sampel memasukkan campuran sampel ke dalam fasa bergerak (campuran pelarut bertekanan seperti air, asetonitril dan / atau metanol) yang memindahkannya ke lajur. Pam memberikan aliran dan komposisi fasa bergerak yang diinginkan melalui lajur. Lajur diisi dengan adsorben, yang merupakan zarah pepejal berbutir seperti silika atau polimer. Pengesan menghasilkan isyarat yang sebanding dengan jumlah kehadiran konstituen sampel di lajur, oleh itu memungkinkan untuk analisis kuantitatif konstituen sampel yang dipilih. Instrumen HPLC dikendalikan, dan analisis data disediakan oleh mikropemproses digital dan perisian pengguna.
Rajah 1: Diagram instrumen HPLC
LCMS: Gambar rajah instrumen LCMS diberikan dalam gambar 2. Ekstrak sampel dimasukkan ke dalam lajur yang terdiri daripada HPLC. Lajur ini mengekalkan metabolit sampel berdasarkan watak fizikal, dan metabolit yang berbeza mengalir ke spektrometer massa pada selang waktu yang berbeza. Spektroskopi jisim digunakan untuk menilai jisim zarah, untuk menentukan susunan unsur molekul, dan untuk menjelaskan struktur molekul. Walau bagaimanapun, sampel harus diionisasi untuk menghasilkan molekul bermuatan untuk menentukan nisbah jisim-casnya. Oleh itu, bukannya instrumen HPLC, LCMS terdiri daripada tiga modul tambahan seperti sumber besi, penganalisis massa, dan alat pengesan. Sumber ion dapat mengubah sampel fasa gas menjadi ion dan penganalisis jisim mengelompokkan ion dengan jisimnya menggunakan medan elektromagnetik. Akhirnya,pengesan mengira nilai dan menyampaikan data setiap ion yang terdapat dalam sampel. Teknik LCMS dapat digunakan untuk aplikasi kualitatif dan kuantitatif.
Rajah 2: Diagram instrumen LCMS
Kesimpulannya, HPLC adalah kaedah kromatografi cecair sedangkan LCMS adalah gabungan kromatografi cair dan spektrometri jisim. Kedua teknik analisis ini mempunyai ciri yang berbeza, tetapi dapat digunakan untuk mengenal pasti dan mengukur komposisi makanan, farmaseutikal, dan molekul bioaktif lain.
