Perbezaan Utama - HPLC vs HPTLC
Perbezaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah bahawa HPLC membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.
Kromatografi adalah kaedah pemisahan fizikal yang digunakan untuk memisahkan dan mengenal pasti komponen dalam campuran. Kedua-dua HPLC dan HPTLC adalah teknik kromatografi. HPLC adalah kromatografi cecair berprestasi tinggi. HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu HPLC
3. Apa itu HPTLC
4. Perbandingan Berdampingan - HPLC vs HPTLC dalam Borang Jadual
5. Ringkasan
Apa itu HPLC?
HPLC adalah kromatografi cecair berprestasi tinggi. Ini adalah teknik analisis yang digunakan untuk memisahkan, mengenal pasti dan mengukur komponen dalam campuran. Dalam teknik ini, sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai. Kemudian pelarut dengan sampel disalurkan melalui pam dengan tekanan yang diberikan. Pam diisi dengan bahan penjerap padat. Kemudian beberapa komponen mengikat kuat ke bahan penyerap sedangkan komponen lain mengikat secara longgar. Ini menyebabkan komponen mempunyai kadar aliran yang berbeza melalui pam. Oleh itu, komponen dapat dipisahkan dengan mudah.
Gambar 01: Sistem HPLC
Bahan adsorben yang mengisi pam dikenali sebagai fasa pegun. Pelarut dengan sampel terlarut dikenali sebagai fasa bergerak. Pam yang digunakan dalam teknik ini dipanggil lajur. Lajur diisi dengan bahan penjerap, yang paling biasa, zarah silika. Ukuran zarah-zarah ini boleh berkisar antara 2-50 μm. Proses pemisahan dipengaruhi oleh komposisi fasa bergerak dan suhu sistem. Interaksi antara fasa pegun dan komponen dalam sampel boleh berupa interaksi hidrofobik, interaksi dipol-dipol, ikatan ionik, dll.
Tekanan operasi HPLC jauh lebih tinggi daripada kromatografi cecair tradisional. Ia terletak sekitar 50-350 bar. Perbezaan antara kromatografi cecair dan HPLC adalah bahawa dalam kromatografi cair, sampel jatuh melalui lajur di bawah graviti sedangkan, di HPLC, sampel bertekanan melalui lajur. Ukuran lajur dan zarah penyerap juga sangat kecil jika dibandingkan dengan kromatografi cecair tradisional. Walau bagaimanapun, resolusi yang diberikan oleh teknik HPLC lebih unggul.
Apa itu HPTLC?
HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi. Ini adalah bentuk TLC tradisional yang maju dan automatik. Teknik ini memberikan resolusi yang cekap dalam jangka masa yang singkat. Dalam kaedah analisis ini, sampel dan rujukan dapat dianalisis pada masa yang sama, yang memungkinkan sampel dibandingkan dengan rujukan. Ia memberikan ketepatan analitik yang lebih baik daripada teknik kromatografi lain. Masa yang diambil untuk analisis adalah lebih sedikit. Teknik itu adalah teknik kos rendah.
Gambar 02: Analisis Pewarna Makanan menggunakan HPTLC
Kaedah HPTLC adalah proses yang mudah, dan langkah penyediaan sampel juga dihilangkan (Dalam TLC tradisional, langkah penyediaan sampel dimasukkan sebelum pemisahan. Langkah ini melibatkan pembersihan dan pengayaan). Pelarut boleh digunakan secara langsung tanpa pra-rawatan walaupun teknik kromatografi lain memerlukan pra-rawatan seperti degassing, filtration, dll.
Bahan adsorben yang digunakan dalam HPTLC adalah silika dengan ukuran zarah yang sangat kecil. Dalam TLC tradisional, ukuran zarah silika adalah 5-20 μm sedangkan, dalam HPTLC, ia adalah 4-8 μm. Sampel digunakan pada plat HPTLC menggunakan aplikator. Ia memberikan aplikasi yang seragam dan selamat. Kemudian plat diletakkan di ruang yang mempunyai fasa bergerak. Ruang harus dipenuhi dengan wap fasa bergerak. Selepas proses HPTLC, bintik-bintik yang telah bergerak dapat dikesan. Semasa mengesan bintik-bintik di piring, teknik HPTLC menggunakan kawasan UV yang sesuai atau ruang yodium.
Apakah Perbezaan Antara HPLC dan HPTLC?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC adalah kromatografi cecair berprestasi tinggi. | HPTLC adalah kromatografi lapisan nipis berprestasi tinggi. |
| Teknik | |
| Dalam HPLC, fasa bergerak dengan pelarut dilalui melalui lajur yang diisi dengan fasa pegun. | Dalam HPTLC, sampel dilihat pada plat TLC dan diletakkan di dalam ruang yang mengandungi fasa bergerak; maka sampel dibiarkan berpindah ke atas plat bersama dengan fasa bergerak. |
| Pengukuran | |
| Dalam HPLC, perbezaan antara kadar aliran komponen melalui lajur digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. | Dalam HPTLC, perbezaan antara jarak yang dilalui oleh setiap komponen dalam sampel digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel. |
| Pemisahan Kuantitatif | |
| HPLC membolehkan pemisahan komponen dalam kuantitatif dalam sampel. | HPTLC tidak membenarkan pemisahan komponen dalam kuantitatif dalam sampel. |
Ringkasan - HPLC vs HPTLC
HPLC dan HPTLC adalah dua teknik kromatografi. Perbezaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah bahawa HPLC membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak membenarkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.
