Perbezaan Utama - YAC vs M13 Phage Vector
Pengklonan DNA adalah proses penting yang memungkinkan penyebaran serpihan DNA organisma penting. Ia memerlukan penggabungan DNA spesifik dengan DNA vektor untuk membuat DNA rekombinan yang berubah menjadi organisma tuan rumah. Vektor adalah molekul DNA yang bertindak sebagai alat untuk membawa bahan genetik asing ke sel atau organisma lain. Ia harus dapat mereplikasi organisma inang dan menghasilkan banyak salinan DNA rekombinan. Terdapat pelbagai jenis vektor yang digunakan dalam pengklonan DNA. Vektor kromosom ragi (YAC) dan M13 phage adalah dua jenis di antaranya. Perbezaan utama antara vektor fag YAC dan M13 adalah bahawa YAC adalah kromosom tiruan yang mereplikasi dalam sel ragi sementara vektor fag M13 adalah DNA bulat tunggal helai bakteriofag M13 yang meniru sel E Coli.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu YAC
3. Apa itu Vektor M13 Phage
4. Perbandingan Berdampingan - Vektor YAC vs M13 Phage
5. Ringkasan
Apa itu Vektor YAC?
YAC adalah kromosom buatan buatan yang mempunyai keupayaan untuk membawa sebilangan besar DNA asing dan mereplikasi dalam sel ragi. Ia mempunyai urutan sentromer, telomere dan peniruan autonomi yang penting untuk replikasi dan kestabilan. YAC juga harus mempunyai penanda selektif atau penanda dan laman sekatan untuk menjadikannya vektor pengklonan yang berkesan. Urutan besar antara 1000 kb hingga 2000 kb dapat dimasukkan ke dalam YAC dan dipindahkan ke dalam ragi.
Gambar 01: Vektor YAC
Apa itu M13 Phage Vector?
Bacteriophage M13 adalah virus yang menjangkiti dan mereplikasi di E Coli. Genom bakteriofag M13 berukuran kecil, kira-kira 6.7 kb. Ia adalah DNA deria tunggal, bulat dan positif. Virus ini secara khusus menjangkiti bakteria E Coli melalui F pilus. Setelah memasukkan ssDNA ke dalam bakteria, ia mensintesis helai pelengkapnya dan menjadi dsDNA atau bentuk replikasi (RF) M13. RF boleh berkelakuan seperti plasmid dalam organisma inang. DsDNA mereplikasi dalam E Coli dan menghasilkan ssDNA yang mengandungi fasa baru. Fag baru ini terus dikeluarkan dari E Coli tanpa membunuh sel inang. Walau bagaimanapun, jangkitan melambatkan pertumbuhan E Coli. dsDNA dapat diekstrak dari sel bakteria dan digunakan sebagai vektor dalam pengklonan DNA. Mereka dikenali sebagai vektor fag M13. Mereka boleh dimanipulasi dengan mudah dan digunakan sama dengan vektor plasmid.
Kemampuan jangkitan pada fag M13 ini berfungsi sebagai kelayakan yang baik untuk dijadikan vektor dalam pengklonan gen. Semasa mengembangkan M13 menjadi vektor, beberapa elemen harus dimasukkan ke dalam genomnya. Mereka adalah, gen untuk protein penindas lac (lac I), wilayah proksimal operator gen lac Z, penyokong lac dan laman kloning berganda (polylinker). Apabila dsDNA dari M13 digunakan sebagai vektor, ia boleh dianggap sebagai vektor plasmid. Walau bagaimanapun, penggunaan ssDNA M13 mempunyai kelebihan dalam penjujukan DNA dan mutagenesis yang diarahkan ke lokasi.
Oleh kerana vektor fag M13 mempunyai banyak laman pengklonan di wilayah lacZ, vektor yang dikombinasikan dengan mudah dapat dikenalpasti dengan pemeriksaan koloni biru / putih pada plat agar yang mengandungi IPTG dan X-Gal. Plak biru yang dihasilkan di atas pinggan tidak mengandungi fag yang dikumpulkan semula. Oleh itu, fasa dengan sisipan dapat dipilih untuk tujuan pengklonan.
Gambar 02: Bakteriofag M13
Apakah perbezaan antara YAC dan M13 Phage Vector?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Vektor YAC vs M13 Phage |
|
| YAC adalah kromosom rekayasa genetik yang mempunyai kemampuan untuk membawa segmen besar DNA asing dan meniru dalam sel ragi. | Vektor phage M13 adalah vektor virus yang dikembangkan oleh bacteriophage M13 yang digunakan untuk memasukkan DNA asing ke dalam E Coli. |
| Tujuan | |
| YAC dirancang untuk mengklon fragmen DNA genomik yang besar ke dalam ragi. | Vektor phage M13 digunakan untuk memasukkan DNA asing ke dalam E Coli. |
| Masukkan Panjang | |
| YAC boleh mengandungi sisipan genom berukuran megabase (1000 kb - 2000 kb). | Ukuran sisipan adalah kira-kira 1,500 bps. |
| Pembinaan | |
| DNA YAC sukar dimurnikan secara utuh dan memerlukan kepekatan yang tinggi untuk menghasilkan sistem vektor YAC. | Ia berlaku melalui rantai elektron fotosintetik siklik. |
| Kestabilan | |
| YAC tidak stabil. | Fag M13 dapat diekstrak dengan mudah. |
| Saiz | |
| Enzim adalah molekul yang lebih besar. | Tahap M13 stabil daripada YAC. |
Ringkasan - YAC vs M13 Phage Vector
YAC adalah sistem vektor buatan buatan menggunakan kawasan tertentu kromosom ragi untuk memasukkan segmen besar bahan genetik ke sel ragi. Vektor phage M13 adalah sistem vektor yang berasal dari bakteriofag M 13 yang menggunakan E coli sebagai organisma tuan rumah. Ini adalah perbezaan utama antara YAC dan M13 Phage Vector. Kedua-duanya sama-sama berguna dalam teknologi DNA rekombinan dan pengklonan gen.
