Perbezaan Utama - Probe vs Primer
Probe molekul adalah serpihan DNA atau RNA kecil yang mengenali urutan pelengkap dalam DNA atau RNA dan memungkinkan pengenalan urutan sasaran. Primer adalah sebilangan kecil DNA atau RNA yang berfungsi sebagai titik permulaan untuk sintesis DNA. Primer dan probe dihibridisasi dengan nukleotida pelengkap DNA templat atau DNA sasaran. Walau bagaimanapun, perbezaan utama antara probe dan primer adalah bahawa primer diperlukan untuk replikasi DNA sementara probe diperlukan untuk mengesan urutan spesifik dalam DNA sampel.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah Probe
3. Apa itu Primer
4. Perbandingan Berdampingan - Probe vs Primer
5. Ringkasan
Apa itu Probe?
Probe adalah serpihan kecil DNA atau RNA yang digunakan untuk mengesan DNA sasaran atau RNA dalam sampel dengan hibridisasi molekul. Mereka juga dikenali sebagai penanda molekul. Panjang probe boleh berbeza-beza (100 hingga 1000 pangkalan), dan nukleotida probe saling melengkapi bahagian urutan sasaran. Untuk kemudahan pengesanan, probe dilabel dengan isotop radioaktif atau dengan pewarna atau antibodi pendarfluor. Probe mengikat dengan asas pelengkap urutan sasaran dan mendedahkan kehadiran DNA sasaran atau RNA dalam sampel. Terdapat dua kaedah utama pelabelan probe: pelabelan akhir dan terjemahan nick. Probe dikategorikan ke dalam pelbagai jenis termasuk probe DNA, probe RNA, probe cDNa dan probe oligonukleotida sintetik, dan mereka disediakan menggunakan teknik yang berbeza.
Probe adalah alat penting dalam banyak bidang mikroba dan molekul seperti virologi, patologi forensik, ujian ayah, cap jari DNA, pengesanan penyakit genetik, RFLP, sitogenetik molekul, hibridisasi in situ, dll.
Gambar 01: Probe berlabel pendarfluor yang digunakan dalam IKAN untuk pengesanan patogen
Apa itu Primer?
Primer adalah serpihan DNA atau RNA pendek yang berfungsi sebagai pemula untuk sintesis DNA. Enzim polimerase DNA menambah nukleotida pada kumpulan urutan primer 3 'OH dan mensintesis helai baru yang melengkapi DNA templat. Primer adalah serpihan yang sangat pendek dengan panjang 18 hingga 20 nukleotida. Mereka disintesis secara kimia di makmal untuk penguatan DNA in vitro (PCR). Primer boleh mempunyai urutan nukleotida kerana ia dirancang oleh pengguna. Mereka disintesis untuk dipadankan dengan asas pelengkap DNA templat. Oleh itu, ia boleh mempunyai urutan nukleotida. Primer sangat penting untuk replikasi DNA kerana DNA polimerase tidak dapat mensintesis DNA baru tanpa sekeping DNA yang sudah ada sebelumnya. Semasa merancang primer untuk PCR, perkara-perkara berikut perlu dipertimbangkan:
- Primer harus mengandungi nukleotida pelengkap ke ujung DNA yang ingin dikuatkan.
- Primer harus mempunyai suhu lebur antara 55 - 65 0 C
- Kandungan G dan C mestilah antara 50 hingga 60%.
Dua primer digunakan dalam PCR sebagai maju dan mundur untuk mereplikasi kedua helai DNA sampel. Primer biasanya digunakan untuk melakukan penjujukan PCR dan DNA.
Gambar 02: Anil primer dalam PCR
Apakah perbezaan antara Probe dan Primer?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Probe vs Primer |
|
| Probe adalah serpihan kecil DNA / RNA yang digunakan untuk mengesan kehadiran urutan sasaran dalam sampel dengan hibridisasi molekul. | Primer adalah sebilangan kecil DNA atau RNA yang berfungsi sebagai titik permulaan replikasi DNA. |
| Fungsi | |
| Ini mengesan kehadiran urutan tertentu dalam sampel DNA atau RNA. | Ini bertindak sebagai titik permulaan untuk sintesis DNA. |
| Panjang | |
| Panjangnya boleh berada dalam julat 100 - 1000 pangkalan | Panjangnya biasanya sekitar 18 - 20 pangkalan |
| Mengikat dengan Urutan Pelengkap | |
| Probe disusun dengan asas pelengkap bagi urutan sasaran | Anime primer dengan asas pelengkap untaian DNA. |
| Melabelkan | |
| Probe dilabel untuk memudahkan pengesanan | Primer umumnya tidak dilabel |
| Gunakan dalam PCR | |
| Probe tidak digunakan dalam PCR | Primer digunakan dalam PCR |
Ringkasan - Probe vs Primer
Probe adalah serpihan kecil urutan DNA atau RNA yang dapat di hibridisasi dengan nukleotida pelengkap untuk mengesan urutan sasaran dalam sampel. Probe dilabel secara radioaktif, imunologi atau pendarfluor untuk melihat kehadiran urutan sasaran. Primer adalah serpihan DNA atau RNA yang sangat kecil yang bertindak sebagai titik permulaan penguatan DNA in vitro. DNA polimerase mengenal pasti primer kumpulan 3 'OH dan memulakan pembinaan helai baru yang melengkapi templat. Probe dan primer berfungsi sama dengan hibridisasi dengan nukleotida pelengkap. Oleh itu, perbezaan utama antara probe dan primer adalah fungsi utama mereka.
