Perbezaan Utama - Elektroforesis Gel vs Halaman SDS
Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan makromolekul dalam medan elektrik. Ini adalah kaedah biasa dalam biologi Molekul untuk memisahkan DNA, RNA dan protein dari campuran mengikut ukuran molekulnya. Halaman SDS adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein dari campuran protein berdasarkan ukurannya. Elektroforesis gel adalah istilah yang digunakan untuk merujuk pada teknik normal yang digunakan untuk pemisahan DNA, RNA, dan protein sementara SDS Page adalah satu jenis elektroforesis gel. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel dan SDS Page.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Gel Elektroforesis
3. Apa itu SDS Halaman
4. Perbandingan Berdampingan - Gel Elektroforesis vs SDS Halaman
5. Ringkasan
Apakah Gel Elektroforesis?
Elektroforesis gel adalah teknik umum yang digunakan di makmal untuk memisahkan molekul bermuatan seperti DNA, RNA, protein, dan lain-lain dari campurannya. Gel digunakan dalam elektroforesis gel. Ia bertindak sebagai penyaring molekul. Terdapat dua jenis gel yang digunakan dalam elektroforesis gel iaitu agarose dan polyacrylamide. Pemilihan gel dan penyediaan gel adalah faktor penting yang harus dipertimbangkan dalam elektrofores gel kerana saiz liang gel harus dimanipulasi dengan teliti untuk pemisahan molekul yang baik melalui elektroforesis gel. Elektroforesis gel mempunyai medan elektrik yang disambungkan ke dua hujung gel. Satu hujung gel menunjukkan cas positif sementara hujung yang lain dicas negatif.
DNA dan RNA adalah molekul bermuatan negatif. Sebaik sahaja mereka dimasukkan ke dalam gel dari hujung gel yang negatif dan diaplikasikan ke medan elektrik, mereka berpindah melalui liang gel ke hujung gel yang bermuatan positif. Kelajuan penghijrahan bergantung pada cas dan ukuran molekul. Molekul yang lebih kecil mudah berpindah melalui liang pori daripada molekul yang lebih besar. Oleh itu, molekul yang lebih kecil menempuh jarak yang jauh melalui gel dan molekul yang lebih besar bergerak dalam jarak yang dekat. Untuk memerhatikan perjalanan molekul pada gel, jenis pewarna khas digunakan. Medan elektrik digunakan untuk jangka waktu tertentu dan dihentikan untuk mencegah kehilangan molekul dan menjaga molekul pada kedudukan perjalanannya. Jalur yang berlainan dapat dilihat pada gel. Jalur ini mewakili molekul dengan ukuran yang berbeza. Oleh itu,elektroforesis gel berguna untuk membezakan molekul mengikut ukurannya.
Elektroforesis gel digabungkan ke dalam pelbagai teknik sebagai teknik persediaan dalam biologi Molekul seperti PCR, RFLP, pengklonan, penjujukan DNA, pembekuan selatan, pemetaan genom, dll.
Rajah 01: Elektroforesis gel agarose
Apa itu Halaman SDS?
Elektroforesis gel poliakrilamida natrium dodecyl sulfate (SDS Page) adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein. Apabila elektroforesis gel digunakan untuk memisahkan protein, rawatan khas diperlukan kerana protein tidak bermuatan negatif seperti DNA dan RNA dan tidak berpindah ke arah positif atau akhir negatif. Oleh itu, protein didenaturasi dan dilapisi dengan muatan negatif sebelum elektroforesis gel. Ia dilakukan dengan menggunakan detergen yang disebut sodium dodecyl sulfate (SDS). Elektroforesis gel yang menggunakan SDS dan gel poliakrilamida untuk media sokongan dikenali sebagai Halaman SDS. Teknik ini biasa digunakan dalam biokimia, genetik, forensik dan biologi molekul.
Semasa Halaman SDS, protein dicampurkan dengan SDS. SDS membongkar protein menjadi bentuk linier dan melapisi mereka dengan muatan negatif berkadar dengan jisim molekulnya. Oleh kerana muatan negatif, molekul protein berpindah ke hujung muatan positif gel dan berpisah mengikut jisim molekulnya. Di Halaman SDS, poliakrilamida digunakan sebagai sokongan padat untuk gel. Pemisahan protein sebenarnya bergantung pada sifat gel. Oleh itu, penyediaan gel poliakrilamida harus dilakukan dengan teliti dan kepekatan poliakrilamida yang betul harus digunakan. Gel poliakrilamida menunjukkan resolusi tinggi daripada gel agarosa. Oleh itu, Halaman SDS dianggap sebagai teknik resolusi tinggi untuk pemisahan protein.
Halaman SDS adalah sejenis elektroforesis gel denaturasi. Ia mempunyai batasan utama dalam analisis protein. Oleh kerana SDS mendefinisikan protein sebelum pemisahan, tidak membenarkan pengesanan aktiviti enzimatik, interaksi pengikatan protein, kofaktor protein, dll
Gambar 02: halaman SDS
Apakah perbezaan antara Gel Elektroforesis dan Halaman SDS?
Elektroforesis Gel vs Halaman SDS |
|
| Elektroforesis gel adalah kaedah yang dilakukan untuk memisahkan makromolekul menggunakan medan elektrik. | Halaman SDS adalah teknik elektroforesis gel resolusi tinggi yang digunakan untuk memisahkan protein berdasarkan jisimnya. |
| Gel Lari | |
| Ia boleh dilakukan secara mendatar atau menegak. | Halaman SDS sentiasa berjalan secara menegak. |
| Asas Pemisahan | |
| Pemisahan berlaku mengikut cas dan ukuran. | Pemisahan protein berlaku mengikut jisim dan cas. |
| Resolusi | |
| Elektroforesis gel agarose mempunyai resolusi rendah dan elektroforesis gel poliakrilamida mempunyai resolusi yang lebih tinggi | Halaman SDS mempunyai resolusi yang lebih baik. |
| Penolakan | |
| Elektroforesis gel merangkumi teknik denaturasi dan bukan denaturasi. | Halaman SDS mendefinisikan protein sebelum pemisahan. |
Ringkasan - Elektroforesis Gel vs Halaman SDS
Elektroforesis gel adalah teknik umum yang digunakan untuk pemisahan dan analisis DNA, RNA dan protein berdasarkan ukuran dan casnya. Terdapat dua jenis elektroforesis gel utama iaitu elektroforesis gel agarosa dan elektroforesis gel poliakrilamida. Gel agarosa digunakan terutamanya untuk pemisahan asid nukleik; apabila resolusi lebih tinggi diperlukan, gel poliakrilamida digunakan. Halaman SDS adalah sejenis elektroforesis gel yang biasa digunakan untuk memisahkan campuran protein kompleks. Ia dianggap sebagai teknik pemisahan protein beresolusi tinggi. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel dan SDS Page.
