Perbezaan Utama - Gel Tumpukan vs Gel Pemisah
Istilah stacking gel dan separating gel digunakan dalam menerangkan teknik SDS-PAGE. Elektroforesis gel SDS-PAGE atau sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide adalah teknik makmal yang digunakan untuk memisahkan molekul protein berdasarkan berat molekulnya. Teori di sebalik teknik ini ialah protein dengan berat molekul yang berbeza menunjukkan kadar migrasi yang berbeza; molekul berat molekul rendah berhijrah lebih cepat sedangkan molekul berat molekul tinggi berpindah perlahan. Medium untuk penghijrahan adalah gel. Terdapat dua jenis gel yang dinamakan sebagai gel susun dan gel pemisah. Perbezaan utama antara gel susun dan gel pemisah adalah bahawa pH gel susun adalah 6.8 sedangkan pH gel pemisah adalah 8.8.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Stacking Gel
3. Apa itu Gel Pemisah
4. Hubungan Antara Stacking Gel dan Separating Gel
5. Perbandingan Side-Side - Stacking Gel vs Separating Gel dalam bentuk Jadual
6. Ringkasan
Apa itu Stacking Gel?
Stacking gel adalah gel poliakrilamida pekat rendah yang diletakkan di bahagian atas gel pelekap lebih pekat (pemisah gel) dalam teknik SDS-PAGE. Gel susun digunakan untuk meningkatkan resolusi elektroforesis. Resolusi meningkat kerana perbezaan antara kepekatan gel penumpukan dan gel pemecah yang mempengaruhi protein dalam sampel. Oleh kerana kepekatan poliakrilamida dalam gel penumpukan rendah, saiz pori lebih tinggi. Ini juga membantu meningkatkan pemisahan.
Gel susun adalah gel poliakrilamida yang longgar dengan liang besar sekitar 7% poliakrilamida. Pori-pori ini tidak bertindak sebagai penghalang yang cukup besar untuk molekul protein besar. Oleh itu gel ini sedikit mempengaruhi pergerakan protein tersebut. Ini membuat pemisahan mengikut pergerakan dan ukuran protein dengan memusatkannya di antara dua gel.
Gambar 01: Gel Acrylamide SDS-PAGE
PH gel susun ialah 6.8. PHnya berasid daripada gel pelarut sebanyak 2 unit pH. PH ini menunjukkan kekuatan ion yang lebih rendah, oleh itu rintangan elektrik yang lebih tinggi. Ini memprovokasi pergerakan protein daripada zarah bermuatan lain yang terdapat di dalam gel.
Apa itu Gel Pemisah?
Teknik pemisahan gel atau gel penyelesaian SDS-PAGE ialah gel poliakrilamida pekat yang diletakkan di bahagian atas gel susun pekat rendah. Gel pemisah mengandungi jumlah poliakrilamida yang tinggi (10%). PH gel ini dipertahankan sebagai pH = 8.8, yang merupakan tahap pH yang lebih tinggi daripada gel susun.
Rajah 02: Alat Elektroforesis Gel
Apabila molekul protein mencapai gel pemisah, penghijrahan molekul tersebut diperlahankan kerana gel pemisah adalah gel berkepekatan tinggi dengan ukuran pori kecil yang dapat bertindak sebagai penghalang yang cukup besar untuk pergerakan molekul protein. Pelambatan ini membolehkan protein lain bergerak perlahan untuk mengejar ketinggalan, menghasilkan jalur pekat yang sempit di antara kedua-dua gel.
Apakah Hubungan Antara Gel Tumpukan dan Gel Pemisah?
Kedua-dua Stacking Gel dan Separating Gel digunakan dalam alat yang sama
Apakah Perbezaan Antara Gel Tumpukan dan Gel Pemisah?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Stacking Gel vs Separating Gel |
|
| Stacking gel adalah gel poliakrilamida pekat rendah yang diletakkan di bahagian atas gel pelekap lebih pekat (pemisah gel) dalam teknik SDS-PAGE. | Memisahkan gel atau menyelesaikan gel teknik SDS-PAGE adalah gel poliakrilamida pekat yang diletakkan di bahagian atas gel susun pekat rendah. |
| Penempatan | |
| Stacking gel diletakkan pada gel pemisah (pemisah). | Gel pemisah diletakkan di bahagian bawah bekas yang digunakan untuk elektroforesis gel. |
| Penumpuan | |
| Kepekatan susun gel tinggi. | Kepekatan gel pemisah rendah. |
| Kandungan poliakrilamida | |
| Stacking gel mengandungi sekitar 7% poliakrilamida. | Gel pemisah mengandungi sekitar 10% poliakrilamida. |
| pH | |
| PH gel susun ialah 6.8. | PH gel pemisah ialah 8.8. |
| Saiz liang | |
| Ukuran liang besar terdapat dalam gel susun. | Ukuran liang kecil terdapat dalam gel pemisah. |
| Resolusi | |
| Stacking gel memberikan resolusi yang lebih baik. | Mengasingkan gel memberikan resolusi yang buruk. |
Ringkasan - Stacking Gel vs Separating Gel
Stacking gel dan separating gel adalah dua jenis gel poliakrilamida yang digunakan untuk mendapatkan pemisahan molekul protein yang lebih baik dalam sampel yang diberikan. Perbezaan antara gel susun dan gel pemisah adalah bahawa pH gel susun adalah 6.8 sedangkan pH gel pemisah adalah 8.8.
