Perbezaan Utama - Elektroforesis Gel Melintang dan Vertikal
Elektroforesis gel adalah teknik makmal yang digunakan dalam genetik untuk memisahkan campuran yang mengandungi DNA, RNA, dan protein lain mengikut cas dan ukuran molekul masing-masing. DNA, RNA atau protein yang perlu dipisahkan dalam kaedah ini dijalankan melalui gel yang mengandungi liang kecil. Molekul digerakkan melalui gel oleh medan elektrik. Molekul-molekul melewati liang-liang gel, dan kelajuan pergerakannya berbanding terbalik dengan panjang masing-masing. Oleh itu, molekul dengan ukuran molekul yang lebih rendah akan bergerak lebih cepat daripada molekul dengan berat molekul yang lebih tinggi. Medan elektrik dihasilkan oleh perbezaan cas pada dua hujung gel. Satu hujung mengandungi cas positif, dan hujung yang lain mengandungi cas negatif. Oleh kerana molekul DNA dan RNA dicas secara negatif,mereka akan tertarik ke arah hujung gel yang bermuatan positif. Elektroforesis gel boleh terdiri daripada dua kaedah yang berbeza: elektroforesis gel mendatar dan elektroforesis gel menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penyangga berjalan berterusan yang terdapat di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel menegak, sistem penyangga berorientasikan secara menegak dan tidak bersambung dengan dua ruang hadir di bahagian atas dan bawah dengan katod dan anod, masing-masing. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penyangga berjalan berterusan yang terdapat di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel menegak, sistem penyangga berorientasikan secara menegak dan tidak bersambung dengan dua ruang hadir di bahagian atas dan bawah dengan katod dan anod, masing-masing. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penyangga berjalan berterusan yang terdapat di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel menegak, sistem penyangga berorientasikan secara menegak dan tidak bersambung dengan dua ruang hadir di bahagian atas dan bawah dengan katod dan anod, masing-masing. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Elektroforesis Gel Mendatar
3. Apa itu Elektroforesis Gel Tegak
4. Persamaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Vertikal
5. Perbandingan Sisi-Sisi - Elektroforesis Gel Melintang dan Vertikal dalam Bentuk Jadual
6. Ringkasan
Apa itu Elektroforesis Gel Mendatar?
Elektroforesis gel mendatar menggunakan teori asas untuk pemisahan molekul DNA, RNA atau protein mengikut ukuran dan cas molekul masing-masing. Dalam teknik ini, gel hadir dalam orientasi mendatar dan tenggelam dalam penyangga yang berterusan. Agarose gel digunakan untuk memisahkan kotak gel menjadi dua petak. Satu hujung kotak gel mengandungi anoda sementara hujung yang lain mengandungi katod. Apabila arus digunakan, penyangga yang digunakan dalam teknik ini memungkinkan penciptaan kecerunan cas. Apabila cas dikenakan, gel cenderung menjadi panas. Penyangga juga berfungsi sebagai penyejuk, yang menjaga suhu pada tahap optimum. Pengedaran semula buffer berjalan menghalang pembentukan kecerunan pH. Sistem penyangga tak putus tidak dapat digunakan dalam elektroforesis gel mendatar kerana kedua-dua ruang sistem gel dihubungkan dengan penyangga berjalan. Acrylamide digunakan semasa elektroforesis gel untuk memisahkan campuran protein.
Gambar 01: Elektroforesis Gel Mendatar
Dalam elektroforesis gel mendatar, akrilamida tidak dapat digunakan kerana kotak gel terkena oksigen. Kerana adanya oksigen, polimerisasi akrilamida dihambat, dan ini mengganggu pembentukan gel. Elektroforesis gel mendatar adalah kaedah mudah yang digunakan dalam pemisahan DNA dan RNA.
Apa itu Elektroforesis Vertikal Gel?
Teknik elektroforesis gel menegak berfungsi mengikut teori utama elektroforesis gel, tetapi ia dianggap lebih kompleks daripada kaedah elektroforesis gel mendatar. Teknik ini menggunakan penyangga tak putus. Katod terletak di ruang atas, dan anod terletak di ruang bawah. Elektrod yang terdapat di setiap petak menyediakan medan elektrik yang diperlukan. Lapisan gel nipis dituangkan di antara kedua-dua plat kaca yang dipasang. Oleh itu, bahagian atas gel tenggelam di ruang atas, dan bahagian bawah gel tenggelam di ruang di bahagian bawah. Setelah arus digunakan, sebahagian kecil penyangga bergerak ke ruang bawah dari ruang atas melalui gel. Arus yang digunakan dalam teknik ini adalah unit minit.
Gambar 02: Elektroforesis Gel Vertikal
Dalam elektroforesis gel menegak, penyangga hanya mengalir melalui gel. Ini membolehkan kawalan kecerunan voltan yang tepat semasa peringkat pemisahan. Gel akrilamida dapat digunakan kerana ruang tidak terkena oksigen atmosfera. Oleh kerana saiz pori-pori gel akrilamida yang lebih kecil, pemisahan yang tepat dapat dicapai dengan resolusi yang lebih tinggi.
Apakah Persamaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Vertikal?
- Kedua-dua sistem berfungsi mengikut teori asas elektroforesis gel.
- Anod dan katod digunakan untuk menyediakan medan elektrik yang diperlukan dalam kedua sistem.
Apakah Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Vertikal?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Elektroforesis Gel Melintang dan Vertikal |
|
Horizontal Gel Electrophoresis adalah teknik elektroforesis gel di mana gel hadir dalam orientasi mendatar. | Vertical Gel Electrophoresis adalah teknik elektroforesis gel di mana gel berorientasikan secara menegak. |
Penyangga | |
Elektroforesis gel mendatar terdiri daripada penyangga berterusan. | Penyangga berjalan tidak berterusan dalam elektroforesis gel menegak. |
Penggunaan Acrylamide | |
Acrylamide tidak dapat digunakan untuk elektroforesis gel mendatar kerana kotak gel terkena oksigen atmosfera. | Oleh kerana gel tidak terkena oksigen atmosfera karena dua ruang terpisah, maka akrilamida dapat digunakan untuk elektroforesis gel menegak. |
Fungsi | |
Elektroforesis gel mendatar lebih kerap digunakan untuk pemisahan campuran DNA dan RNA tetapi bukan protein. | Elektroforesis gel menegak digunakan untuk memisahkan campuran protein. |
Ringkasan - Elektroforesis Gel Mendatar vs Vertikal
Elektroforesis gel adalah teknik makmal yang banyak digunakan dalam pemisahan campuran yang mengandungi molekul DNA, RNA, dan protein. Terdapat dua kaedah elektroforesis gel: elektroforesis gel mendatar dan menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, penyangga berjalan berterusan dan dalam elektroforesis gel menegak, ia tidak putus Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak. Kedua-dua sistem berfungsi mengikut prinsip umum elektroforesis gel.
Muat turun Versi PDF Elektroforesis Gel Mendatar vs Vertikal
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam catatan petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Vertikal.