Elektroforesis vs Electroosmosis
Kaedah pemisahan fizikal seperti penapisan, penyulingan, kromatografi lajur bukanlah kaedah yang mudah untuk pemisahan beberapa molekul. Elektroforesis dan elektro-osmosis adalah dua teknik pemisahan lain yang boleh digunakan untuk memisahkan zarah bermuatan.
Apa itu Elektroforesis?
Elektroforesis adalah teknik memisahkan molekul berdasarkan ukurannya. Asas untuk pemisahan ini adalah muatan molekul dan kemampuan mereka bergerak di medan elektrik. Ini adalah teknik yang paling umum dan utama dalam biologi molekul untuk memisahkan molekul, terutama DNA dan protein. Ini kebanyakan digunakan kerana agak mudah dan murah. Alat untuk elektroforesis agak rumit, dan penyediaannya memerlukan sedikit masa. Tetapi kita dapat membuat alat elektroforesis dengan mudah dari perkara yang kita ada di makmal. Teknik elektroforesis boleh berbeza-beza bergantung pada tujuan kita. Kita boleh menggunakan elektroforesis satu dimensi untuk pemisahan DNA atau protein. Elektroforesis dua dimensi digunakan apabila sampel yang lebih diselesaikan diperlukan (seperti dalam kes pencetakan jari). Gel digunakan sebagai media sokongan untuk memisahkan molekul. Gel ini boleh disediakan sebagai kepingan rata atau dalam tiub. Asas prosedur ini adalah memisahkan molekul bergantung pada kadar pergerakannya melalui gel ketika medan elektrik dibekalkan. Molekul bermuatan negatif seperti DNA cenderung bergerak ke arah kutub positif di medan elektrik ini sementara molekul bermuatan positif cenderung bergerak ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarosa dan poliakrilamida. Kedua-duanya mempunyai daya penyelesaian yang berbeza. Gel berfungsi sebagai penapis untuk menapis pelbagai molekul dengan saiz yang berbeza. Cas elektrostatik yang tersusun dalam gel bertindak sebagai daya. Asas prosedur ini adalah memisahkan molekul bergantung pada kadar pergerakannya melalui gel ketika medan elektrik dibekalkan. Molekul bercas negatif seperti DNA cenderung bergerak ke arah kutub positif di medan elektrik ini sementara molekul bermuatan positif cenderung bergerak ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarosa dan poliakrilamida. Kedua-duanya mempunyai daya penyelesaian yang berbeza. Gel berfungsi sebagai penapis untuk menapis pelbagai molekul dengan saiz yang berbeza. Cas elektrostatik yang tersusun dalam gel bertindak sebagai daya. Asas prosedur ini adalah memisahkan molekul bergantung pada kadar pergerakannya melalui gel ketika medan elektrik dibekalkan. Molekul bercas negatif seperti DNA cenderung bergerak ke arah kutub positif di medan elektrik ini sementara molekul bermuatan positif cenderung bergerak ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarosa dan poliakrilamida. Kedua-duanya mempunyai daya penyelesaian yang berbeza. Gel berfungsi sebagai penapis untuk menapis pelbagai molekul dengan saiz yang berbeza. Cas elektrostatik yang tersusun dalam gel bertindak sebagai daya. Kedua-duanya mempunyai daya penyelesaian yang berbeza. Gel bertindak sebagai penapis untuk menapis pelbagai molekul yang berbeza. Cas elektrostatik yang tersusun dalam gel bertindak sebagai daya. Kedua-duanya mempunyai daya penyelesaian yang berbeza. Gel berfungsi sebagai penapis untuk menapis pelbagai molekul yang berbeza. Cas elektrostatik yang tersusun dalam gel bertindak sebagai daya.
Pemisahan bergantung kepada pergerakan ion.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = daya yang bertindak pada zarah
f = pekali geseran
V = halaju penghijrahan purata
Z = cas zarah yang berpindah
e = cas asas
E = kekuatan medan elektrik
Keadaan yang diperlukan untuk elektroforesis agak sederhana. Semasa membuat gel dan menjalankan sampel, penyangga digunakan. Penanda dan pewarna digunakan untuk tujuan visualisasi.
Apa itu Electro-osmosis?
Ini adalah proses memindahkan cecair melalui bahan menggunakan medan elektrik terpakai. Pergerakan boleh melalui bahan berpori, di sepanjang kapilari, membran dll. Ini boleh digunakan sebagai teknik pemisahan (terutamanya elektro-osmosis kapilari). Halaju cecair berkadar linear dengan medan elektrik yang digunakan. Ia juga bergantung pada bahan yang digunakan untuk membina saluran dan penyelesaian yang digunakan. Di antara muka, penyelesaian dan bahan memperoleh cas yang berlawanan dan, ini dikenali sebagai lapisan berganda elektrik. Apabila medan elektrik diterapkan pada larutan, lapisan dua elektrik bergerak oleh daya Coulomb yang dihasilkan. Ini dikenali sebagai aliran elektro-osmotik.
Apakah perbezaan antara Electrophoresis dan Electro-osmosis?
• Dalam elektroforesis, zarah pepejal (makromolekul seperti asid nukleik atau protein) digerakkan menggunakan medan elektrik. Tetapi dalam elektro-osmosis cecair bergerak.
• Dalam elektroforesis, bahan pepejal sokongan adalah gel. Tetapi elektro-osmosis ia boleh menjadi gel, membran, kapilari, dll.
