Perbezaan Antara Imunofluoresensi Dan Imunohistokimia

2024 Pengarang: Mildred Bawerman | [email protected]. Diubah suai terakhir: 2023-12-16 08:40

Perbezaan Utama - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia

Diagnostik penyakit, yang menggunakan kaedah biologi molekul, telah menjadi bidang teknologi makmal klinikal yang baru muncul. Ini merangkumi semua ujian dan kaedah untuk mengenal pasti penyakit dan memahami penyebab penyakit dengan menganalisis DNA, RNA atau protein yang dinyatakan dalam organisma. Kemajuan yang cepat dalam diagnostik molekul telah memungkinkan penyelidikan asas mengenai penyakit berjangkit dan tidak berjangkit. Ini digunakan untuk menentukan perubahan urutan atau tahap ekspresi dalam gen penting atau protein yang terlibat dalam penyakit. Immunofluorescence (IF) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang banyak digunakan dalam biologi barah. IF adalah sejenis IHC di mana kaedah pengesanan pendarfluor digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, sedangkan IHC menggunakan kaedah berasaskan kimia untuk mengesan antibodi monoklonal dan poliklonal. Ini adalah perbezaan utama antara IF dan IHC.

KANDUNGAN

1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama

2. Apa itu Imunofluoresensi

3. Apa itu Imunohistokimia

4. Persamaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia

5. Perbandingan Berdampingan - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia dalam Borang Jadual

6. Ringkasan

Apa itu Immunofluorescence (IF)?

Immunofluorescence adalah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian diberi label menggunakan pewarna pendarfluor atau protein pendarfluor untuk tujuan pengesanan. Antibodi sekunder berlabel boleh menghasilkan isyarat latar belakang yang tidak diingini; oleh itu, teknik IF didasarkan pada pelabelan antibodi primer itu sendiri untuk mengelakkan isyarat yang tidak diingini semasa pengesanan. Melalui teknik ini, pengikatan tidak spesifik antara antibodi primer dan sekunder dicegah, dan lebih cepat kerana tidak ada langkah inkubasi sekunder yang terlibat. Kualiti data juga ditingkatkan.

Gambar 01: Pewarnaan imunofluoresensi berganda untuk BrdU, NeuN, dan GFAP

Fluorokrom atau pewarna pendarfluor adalah sebatian yang dapat menyerap sinaran, lebih baik sinaran ultra violet yang teruja. Apabila zarah mencapai keadaan tanah dari keadaan teruja, mereka memancarkan sinaran yang ditangkap dan dikesan oleh pengesan untuk membentuk spektrum. Amat penting bahawa label pendarfluor serasi dan stabil untuk tindak balas tertentu dan label itu mesti disambungkan dengan betul ke antibodi untuk mendapatkan hasil yang tepat. Salah satu fluorokrom yang paling banyak digunakan adalah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan panjang gelombang puncak penyerapan dan pelepasan masing-masing 490 nm dan 520 nm. Rhodamine, agen lain yang digunakan dalam IF, berwarna merah dan mempunyai panjang gelombang puncak penyerapan dan pelepasan berbeza iaitu 553 nm dan 627 nm.

Apa itu Imunohistokimia (IHC)?

IHC adalah kaedah pengujian molekul yang diamalkan untuk mengenal pasti dan mengesahkan kehadiran antigen dalam sel sasaran. Sel sasaran dapat berupa zarah berjangkit, patogen mikroba atau sel tumor ganas. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan kehadiran antigen yang terdapat di permukaan sel sel sasaran. Teknik ini berdasarkan pengikatan antigen-antibodi. Penanda pengesanan disambungkan ke antibodi ini untuk mengesan kehadiran atau ketiadaan antigen tertentu. Penanda ini boleh menjadi penanda kimia seperti enzim, antibodi berlabel fluoresen atau antibodi berlabel radio.

Gambar 02: Potongan otak tikus yang diwarnai oleh Immunohistochemistry

Aplikasi IHC yang paling popular adalah dalam biologi sel barah untuk mengenal pasti kehadiran tumor malignan, tetapi juga digunakan untuk mengesan penyakit berjangkit.

Apakah Persamaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?

• Imunofluoresensi dan Imunohistokimia berlaku dalam keadaan in vitro.
• Kedua-dua teknik ini berdasarkan antigen-antibodi
• Kedua-duanya adalah teknik yang sangat pantas.
• Hasil teknik dapat dihasilkan semula.
• Kedua-duanya mempunyai kualiti data yang lebih baik.
• Teknik ini digunakan dalam diagnostik untuk kanser dan penyakit berjangkit.

Apakah Perbezaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?

Artikel Diff Tengah sebelum Jadual

Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
IF adalah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian dilabel menggunakan pewarna pendarfluor atau protein pendarfluor untuk pengesanan.	IHC adalah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian dilabel menggunakan bahan kimia atau unsur radioaktif untuk pengesanan.
Ketepatan
Ketepatan lebih tinggi dalam teknik IF berbanding IHC.	Ketepatan lebih rendah di IHC.
Kekhususan
JIKA lebih spesifik.	IHC kurang spesifik.

Ringkasan - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia

Mekanisme molekul telah membawa banyak perubahan dalam bidang perubatan, yang menimbulkan kaedah ujian molekul maju yang telah membawa revolusi dalam bidang diagnostik. Penemuan ini telah membawa kepada pengenalan dan pengesahan penyakit yang cepat dan tepat, sehingga memungkinkan untuk berjaya dan menghasilkan ubat. Teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk mencari sasaran ubat dan untuk mengesahkan sifat farmakokinetik ubat semasa metabolisme ubat. IF dan IHC adalah dua kaedah diagnostik yang didasarkan pada konsep pengikatan antigen dan antibodi, walaupun cara pengesanan dalam kedua teknik ini berbeza. JIKA menggunakan prinsip pendarfluor untuk mengesan antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mengesan antigen. Ini adalah perbezaan antara IF dan IHC.

Muat turun Versi PDF Immunofluorescence vs Immunohistochemistry

Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam catatan petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia.