Perbezaan Utama - Polimerase Taq vs Polimerase DNA
DNA polimerase adalah enzim yang menghasilkan DNA baru dari blok bangunannya (nukleotida). Dalam prokariota dan eukariota, terdapat pelbagai jenis polimerase DNA. Penduaan DNA dapat dilakukan kerana adanya enzim khas ini, dan maklumat genetik disampaikan kepada keturunan dengan tindakan DNA polimerase. Taq polymerase adalah jenis polimerase DNA khas yang termostabil dan digunakan secara meluas dalam PCR. Taq polymerase terdapat dalam bakteria termofilik dan dimurnikan dalam replikasi DNA in vitro. Perbezaan utama antara polimerase Taq dan polimerase DNA adalah bahawa polimerase Taq dapat menahan suhu tinggi tanpa denaturasi sementara polimerase DNA lain mengalami penolakan pada suhu tinggi (pada suhu penurunan protein)
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Polimerase Taq
3. Apa itu Polimerase DNA
4. Perbandingan Berdampingan - Polimerase Taq vs Polimerase DNA
5. Ringkasan
Apa itu Polimerase Taq?
Taq polymerase (Taq DNA polymerase) adalah enzim yang digunakan untuk mensintesis DNA in vitro dengan teknik PCR. Ia dihasilkan oleh bakteria termofilik yang disebut Thermus aquaticus yang tinggal di mata air panas dan lubang termal. Taq polymerase adalah enzim termostabil yang tidak merosot pada suhu tinggi. Taq polymerase dimurnikan untuk pertama kalinya dan diterbitkan dalam Chien et al. pada tahun 1976. Teknik PCR dilakukan dengan bantuan Taq polymerase kerana keupayaannya untuk mentolerir turun naik suhu dan suhu tinggi semasa PCR. Taq polymerase memangkinkan sintesis DNA apabila terdapat primer, nukleotida dan DNA templat tunggal. Enzim terdiri daripada satu polipeptida dengan berat molekul sekitar 94 kDa. Taq polymerase menunjukkan aktiviti optimumnya pada suhu 80 ° C dan pada jarak pH 7 - 8 dengan kehadiran ion Magnesium. Ia mempunyai aktiviti polimerase dan exonuclease. Enzim terdiri daripada rantai polipeptida tunggal dan gen untuk Taq polymerase mengandungi kandungan G dan C yang tinggi (67.9%).
Thermostable Taq polymerase membolehkan melakukan PCR pada suhu tinggi yang meningkatkan kekhususan primer dan pengurangan menghasilkan produk PCR yang tidak diingini (primer dimer). Taq polymerase juga menghilangkan keperluan untuk menambahkan enzim baru pada reaksi PCR setelah setiap kitaran tindak balas PCR kerana kemampuannya untuk menahan suhu tinggi. Penemuan polimerase Taq membolehkan PCR berfungsi dalam satu tiub tertutup dalam mesin yang agak mudah. Oleh kerana sifat Taq polymerase ini, PCR menjadi teknik makmal yang dilakukan secara rutin yang popular dalam banyak analisis biologi molekul mengenai analisis DNA.
Taq polymerase digunakan secara meluas dalam teknik biologi molekul, dan terdapat keperluan untuk pengeluaran polimerase Taq berskala besar. Oleh itu, dengan menggunakan teknologi DNA rekombinan dan pengklonan gen, gen yang mengekod polimerase DNA Taq telah diklon dan dinyatakan dalam Escherichia coli. Ini telah memudahkan pengeluaran polimerase Taq rekombinan dan mengurangkan harga enzim ini untuk penggunaan yang mencukupi.
Gambar 1: Polimerase Taq
Apa itu Polimerase DNA?
DNA polimerase adalah enzim yang memangkinkan sintesis DNA dari nukleotida. Ia adalah enzim paling tepat yang bertanggungjawab untuk menduplikasi genom dan menyampaikan maklumat genetik kepada keturunan. Semasa pembahagian sel, DNA polimerase menggandakan semua DNAnya dan menyampaikan satu salinan ke setiap sel anak perempuan. Pada tahun 1955, Arthur Kornberg ditemui DNA polimerase di E Coli. Fungsi polimerase DNA bergantung kepada beberapa keperluan; DNA templat, ion Mg +2, keempat-empat jenis deoxynucleotides (dATP, dTTP, dCTP dan d GTP), dan urutan pendek RNA (primer). Sintesis DNA dilakukan mengikut arah 5'to 3 'oleh DNA polimerase.
DNA polimerase dapat dikelompokkan menjadi tujuh keluarga yang berbeza: A, B, C, D, X, Y, dan RT (Reverse transcriptase). Retrovirus mengekod untuk RT; polimerase DNA yang tidak biasa yang memerlukan templat RNA untuk sintesis DNA. Terdapat lima jenis polimerase DNA yang terdapat di prokariota untuk peranan yang berbeza dalam replikasi DNA. DNA polimerase 3 bertanggungjawab untuk pempolimeran untaian DNA baru. DNA polimerase 1 bertanggungjawab untuk memperbaiki dan menambal DNA. DNA polimerase 2, 4 dan 5 bertanggungjawab untuk memperbaiki dan mengoreksi DNA. Dalam eukariota, terdapat 15 jenis polimerase DNA. Mereka merangkumi lima keluarga utama.
Rajah 2: Polimerase DNA
DNA polimerase digunakan dalam pengklonan gen, PCR, penjujukan DNA, pengesanan SNP, diagnostik molekul, dan lain-lain. Taq polymerase adalah salah satu jenis polimerase DNA yang dapat mentolerir suhu tinggi dan tersedia untuk sintesis DNA tanpa degradasi.
Apakah perbezaan antara Polimerase Taq dan Polimerase DNA?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Taq Polymerase vs DNA Polymerase |
|
| Taq DNA polymerase adalah enzim yang menghasilkan DNA. Ia adalah enzim termostabil yang terdapat pada termofil | DNA polimerase adalah enzim yang memudahkan replikasi DNA dan terdapat pada organisma prokariotik dan eukariotik. |
| Kemerosotan pada Suhu Tinggi | |
| Taq polymerase aktif pada suhu tinggi. | DNA polimerase merosot pada protein yang mendekatur suhu tinggi. |
| Gunakan | |
| Ini digunakan secara meluas dalam PCR | Taq polymerase menggantikan polimerase DNA dari coli yang pada asalnya digunakan dalam PCR. |
Ringkasan - Polimerase Taq vs Polimerase DNA
DNA polimerase adalah enzim yang mensintesis DNA dari deoxynucleotides (blok bangunan DNA) apabila templat dan primer tersedia. DNA polimerase diperlukan untuk menduplikasi DNA sel dan masuk ke sel anak yang sama semasa pembahagian sel. DNA polimerase menambah nukleotida baru ke hujung primer 3 'dan memanjangkan sintesis untaian DNA baru ke arah 5' hingga 3 '. Taq DNA polimerase adalah salah satu enzim polimerase DNA yang sangat berguna dalam kaedah reaksi berantai polimerase (PCR) penguatan DNA. Polimerase DNA E. coli digunakan lebih awal untuk PCR, tetapi polimerase Taq komersial menggantikannya kerana kekhususan pengikatan primer yang tinggi pada suhu tinggi dan pengeluaran hasil yang lebih tinggi dari produk yang diinginkan dengan produk penguat yang tidak spesifik. Inilah perbezaan antara Taq Polymerase dan DNA Polymerase.
