Perbezaan Utama - Phusion vs Taq Polymerase
DNA polimerase adalah enzim yang banyak digunakan dalam teknik biologi molekul dan juga terdapat secara semula jadi dalam semua organisma yang mengalami replikasi DNA. Mereka adalah enzim polimerisasi utama yang melibatkan semasa replikasi. DNA polimerase mampu menambahkan nukleotida ke hujung 3 'helai DNA bebas sehingga menyebabkan pemanjangan untaian baru. Pada masa ini, kerana perkembangan biologi molekul dalam diagnostik penyakit dan aplikasi industri, penting untuk membuat polimerase yang mempunyai pelbagai sifat bermanfaat. Ini meningkatkan ketepatan kaedah dan menjadikannya teknik yang lebih pantas. Phusion dan Taq polymerase adalah dua enzim polimerase termostabil yang dihasilkan secara komersial yang digunakan dalam aplikasi molekul khas. Phusion adalah polimerase DNA yang diasingkan dari Pyrococcus furiosus dan digunakan terutamanya dalam eksperimen pengklonan untuk meningkatkan kesetiaan. Taq DNA Polymerase adalah polimerase DNA standard yang digunakan dalam Reaksi Rantai Polimerase (PCR), dan ia diasingkan dari bakteria termostabil; Thermus aquaticus. Perbezaan utama antara dua enzim adalah mikroorganisma sumber. Phusion diasingkan dari extremeophile, Pyrococcus furiosus sedangkan, Taq polymerase diasingkan dari termophile, Thermus aquaticus. Taq polymerase diasingkan dari termophile, Thermus aquaticus. Taq polymerase diasingkan dari termophile, Thermus aquaticus.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apakah itu Phusion
3. Apa itu Polimerase Taq
4. Persamaan Antara Polimerase Fusion dan Taq
5. Perbandingan Berdampingan - Polimerase Fusion vs Taq dalam Bentuk Jadual
6. Ringkasan
Apa itu Phusion?
Phusion DNA polymerase adalah polimerase baru yang dihasilkan dengan mengasingkan enzim dari Pyrococcus furiosus, yang merupakan ekstremofilik Archaea. Mikroba ini berada dalam keadaan suhu yang sangat tinggi, sehingga menjadikan polimerase sebagai polimerase yang sangat panas. Phusion polymerase digunakan untuk mendapatkan kesetiaan yang melampau berbanding polimerase termostabil konvensional; Taq polimerase. Phusion polymerase mampu menguatkan templat panjang hingga 7.5kb DNA genom. Kapasiti polimerisasi optimum polimerase Phusion adalah pada 72 0 C. Phusion juga digunakan dalam produk pengklonan untuk penjujukan, analisis ekspresi dan analisis mutasi.
Phusion DNA polymerase mempunyai aktiviti exonuclease 3 '- 5'. Ini membolehkan pembacaan semula helai yang baru disintesis selepas sintesis. Oleh itu, ketidakcocokan nukleotida mudah diperbaiki. Oleh itu, ia mempunyai kadar kesalahan yang lebih rendah. Kelebihan keseluruhan Phusion polymerase adalah;
- Kesetiaan yang melampau
- Kelajuan tinggi dan masa peluasan yang dikurangkan
- Reaksi yang kuat dan memerlukan pengoptimuman minimum
- Hasil yang tinggi
Gambar 01: Fusion
Kelemahan utama Phusion polymerase ialah ia dihambat dengan adanya deoxyuridine triphosphate (dUTP). Apabila dUTP terkumpul dalam campuran tindak balas, ia boleh menghalang tindakan Phusion polymerase. Ini dicegah dengan mengolah campuran reaksi dengan dUTPase sebelum menambahkan enzim. Pada masa ini, varian tahan DUTP dari Phusion polymerase yang dikenali sebagai Pfu Turbo digunakan sebagai ganti Phusion polymerase sebagai penawar masalah ini.
Apa itu Polimerase Taq?
Penemuan DNA polimerase Taq telah merevolusikan bidang biologi molekul. Ia menyelesaikan masalah besar dalam penguatan DNA. Taq DNA polymerase adalah enzim polimerase stabil panas yang diekstrak dan diasingkan dari bakteria termofilik, Thermus aquaticus. Penemuan enzim ini membawa kepada pengembangan PCR. Enzim ini telah membenarkan penggunaan reaksi berantai polimerase dalam penguatan DNA dan bukannya teknik pengklonan yang konvensional. PCR kini digunakan dalam diagnostik molekul, pertanian dan industri dengan banyak variasi baru yang ditambahkan pada teknik ini.
Gambar 02: Polimerase Taq
Taq DNA polymerase berfungsi pada julat suhu optimum antara 72 0 C - 80 0 C. Taq DNA polimerase memerlukan faktor bersama; magnesium untuk fungsinya. Taq polymerase tidak mempunyai kemampuan membaca semula 3 '- 5', oleh itu, kadar kesalahan polimerase DNA Taq tinggi berbanding dengan jenis polimerase DNA yang lebih baru seperti polimerase fusi dll. Tetapi, populariti polimerase DNA Taq tetap menjadi sama di seluruh dunia sains kerana kemudahan dan kelenturan enzim.
Apakah Persamaan Antara Polimerase Phusion dan Taq?
- Enzim polimerase Phusion dan Taq adalah enzim polimerisasi yang mampu menambahkan nukleotida ke hujung bebas 3 'untai DNA.
- Kedua-dua polimerase Phusion dan Taq memerlukan urutan primer untuk memulakan pempolimeran.
- Kedua-dua polimerase Phusion dan Taq stabil haba.
- Kedua-dua polimerase Phusion dan Taq digunakan dalam mekanisme PCR untuk memperkuat DNA.
- Semasa menambahkan polimerase ke campuran tindak balas, kedua polimerase Phusion dan Taq ditambahkan terakhir untuk memastikan kecekapan enzim.
- Kedua-dua polimerase Phusion dan Taq disintesis secara komersial untuk tujuan eksperimen biologi molekul.
- Kedua-dua polimerase Phusion dan Taq memerlukan kofaktor untuk menyelesaikan fungsinya.
Apakah Perbezaan Antara Polimerase Fusion dan Taq?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Polimerase Phusion vs Taq |
|
| Phusion adalah polimerase DNA yang diasingkan dari Pyrococcus furiosus dan digunakan terutamanya dalam eksperimen pengklonan untuk meningkatkan kesetiaan. | Taq DNA Polymerase adalah polimerase DNA standard yang digunakan dalam Polimerase Chain Reaction (PCR), dan ia diasingkan dari bakteria termostabil, Thermus aquaticus. |
| Organisma Sumber | |
| Phusion diekstrak dari archaea ekstrofofilik - Pyrococcus furiosus. | Karya sastera ini merangkumi dari zaman penjajahan hingga zaman dekolonisasi. |
| Keupayaan membaca bukti | |
| Keupayaan membaca bukti 3 '- 5' terdapat di Phusion. | Keupayaan membaca bukti 3 '- 5' tidak ada dalam Taq polymerase. |
| Kesetiaan | |
| Kesetiaan tinggi ada dengan Phusion. | Taq polymerase menunjukkan kesetiaan yang rendah. |
| Pengukuhan | |
| Phusion mampu menguatkan serpihan DNA yang panjang. | Taq polymerase mampu menguatkan serpihan DNA yang jauh lebih pendek. |
| Keracunan dUTP | |
| Tindakan fusi dihambat oleh pengumpulan yang ganjil. | Taq polymerase tidak dihambat oleh dUPT. |
Ringkasan - Phusion vs Taq polymerase
Phusion and Taq DNA polymerase adalah dua polimerase stabil panas yang digunakan dalam teknik PCR. Phusion adalah polimerase yang diasingkan dari ekstremofil, Pyrococcus furiosus sedangkan, Taq diasingkan dari bakteria termostum Thermus aquaticus. Penemuan DNA polimerase Taq membawa kepada penemuan PCR. Phusion mempunyai banyak kelebihan berbanding Taq yang menjadikan Phusion sebagai pilihan yang lebih baik dalam menghasilkan DNA kesetiaan tinggi. Walau bagaimanapun, Taq polymerase masih digunakan sebagai enzim polimerase standard dalam PCR. Inilah perbezaan antara polimerase Phusion dan Taq.
