Perbezaan Utama - Gram Stain vs Acid Fast
Bakteria adalah mikroorganisma yang sangat kecil. Mereka telus, dan pengesanannya sukar dalam keadaan hidup dan tidak ternoda. Oleh itu, pelbagai kaedah pewarnaan dikembangkan untuk memudahkan pengesanan bakteria. Terdapat tiga jenis teknik pewarnaan utama: pewarnaan sederhana, pewarnaan berbeza, dan pewarnaan struktur. Pewarnaan pembezaan adalah teknik yang menggunakan lebih daripada satu noda untuk membezakan bakteria. Noda gram dan noda cepat asid paling dikenali sebagai noda pembezaan. Pewarnaan gram adalah teknik pewarnaan berbeza, yang memisahkan bakteria menjadi dua kumpulan yang dikenali sebagai bakteria Gram-positif dan bakteria Gram-negatif. Noda cepat asid adalah noda pembezaan yang digunakan untuk mengenal pasti organisma cepat asid seperti Mycobacterium dari organisma cepat bukan asid. Ini adalah perbezaan utama antara pewarnaan Gram dan pewarnaan Asid Cepat.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Gram Stain
3. Apa itu Asid Cepat
4. Persamaan Antara Gram Stain dan Acid Fast
5. Perbandingan Berdampingan - Gram Stain vs Acid Fast dalam Jadual Jadual
6. Ringkasan
Apa itu Gram Stain?
Gram stain adalah teknik pewarnaan pembezaan penting yang digunakan untuk mengenal pasti bakteria dalam mikrobiologi. Teknik ini diperkenalkan oleh Pakar Bacteriologis Denmark Hans Christian Gram pada tahun 1884. Pewarnaan Gram mengkategorikan bakteria menjadi dua kumpulan utama bernama gram positif dan gram negatif, yang sangat penting dalam klasifikasi dan pengenalpastian bakteria. Ahli mikrobiologi melakukan pewarnaan gram sebagai langkah awal pencirian bakteria semasa kajian mereka.
Bakteria dikumpulkan berdasarkan perbezaan dinding selnya. Bakteria gram positif terdiri daripada lapisan peptidoglikan tebal di dinding sel mereka sementara bakteria gram negatif terdiri daripada lapisan peptidoglikan nipis di dinding sel mereka. Hasil pewarnaan gram akan didasarkan pada perbezaan ketebalan lapisan peptidoglikan dinding sel.
Pewarnaan gram dilakukan dengan menggunakan empat reagen berbeza iaitu; noda primer, mordant, agen penyahwarnaan dan noda kontra. Crystal violet dan safranin digunakan sebagai noda primer dan penghilang, sementara gram iodin dan 95% alkohol masing-masing digunakan sebagai mordant dan dekolourizer. Langkah asas pewarnaan gram adalah seperti berikut;
- Lapisan bakteria disediakan pada slaid kaca bersih, panas tetap dan disejukkan.
- Smear dibanjiri dengan ungu kristal selama 1 - 2 minit.
- Smear dibilas dengan air paip yang perlahan untuk menghilangkan noda berlebihan.
- Gram iodin digunakan pada smear selama 1 minit.
- Smear dibilas dengan air paip yang perlahan
- Smear dibasuh dengan alkohol 95% selama 2 - 5 saat dan dibilas dengan air paip yang perlahan.
- Smear dikotori dengan safranin selama 1 minit
- Smear dibilas dengan air paip yang perlahan, dikeringkan dan diperhatikan di bawah mikroskop.
Pada akhir noda gram, bakteria gram negatif akan diperhatikan dalam warna merah jambu sementara bakteria gram positif akan diperhatikan dalam warna ungu.
Gambar 01: Bakteria Gram negatif dan Gram positif
Hasil noda gram ditentukan oleh ketebalan lapisan peptidoglikan di dinding sel mereka. Semasa langkah penyahwarnaan, noda primer dan mordant dengan mudah dikeluarkan dari bakteria gram negatif dan menjadi tidak berwarna kerana mereka mempunyai lapisan peptidoglikan nipis. Noda utama disimpan dalam bakteria gram positif kerana mereka mempunyai lapisan peptidoglikan tebal. Noda pembilang tidak akan berkesan untuk bakteria gram positif kerana pengekalan noda primer. Oleh itu, gram positif bakteria akan kelihatan dalam warna noda primer, iaitu warna ungu. Noda pembilang akan mengotorkan bakteria gram negatif, dan mereka akan kelihatan dalam warna pilih, yang merupakan warna safranin. Oleh itu, mudah untuk mengkategorikan bakteria menjadi dua kumpulan mengikut noda gram dan ia sangat berguna dalam pembezaan dan pengenalpastian bakteria.
Apakah Asid Cepat?
Ketahanan asid adalah sifat fizikal bakteria tertentu, khususnya ketahanannya terhadap perubahan warna oleh asid semasa prosedur pewarnaan. Setelah diwarnai, organisma ini menentang prosedur penghilangan warna berdasarkan asid dan atau etanol yang biasa dalam banyak protokol pewarnaan. Oleh itu, nama 'asid cepat' diberikan kepada organisma tersebut. Sifat ini ditunjukkan kerana mempunyai kandungan bahan lilin (asid mikolik) yang tinggi di dinding selnya. Ujian ini sangat penting untuk mengenal pasti Mycobacterium tuberculosis.
Gambar 2: Mycobacteria Fast Acid
Noda cepat asid ini dikembangkan oleh Paul Ehrlich pada tahun 1882. Teknik cepat asid Ehrlich telah diubah suai oleh Ziehl-Neelsen dan kini ia lebih kerap digunakan. Prosedur pewarnaan cepat asid melibatkan tiga reagen berbeza. Carbol fuschin digunakan sebagai noda utama. Alkohol asid digunakan sebagai agen penyahwarnaan. Methylene Blue digunakan sebagai penghilang noda. Prosedur pewarnaan dilakukan seperti berikut.
- Noda primer (carbol fuchsin) digunakan pada spesimen tetap pada slaid (Semua sel akan diwarnai dengan warna merah).
- Slaid dipanaskan dengan mengukus selama 5 minit, yang menyebabkan noda masuk ke dalam sel dengan betul.
- Kemudian larutan penyahwarnaan ditambahkan (Ini menghilangkan pewarna merah dari semua sel kecuali bakteria cepat asid).
- Biru metilena ditambahkan sebagai penghilang noda (Ia mewarnai semua sel bakteria yang tidak berwarna).
- Bakteria cepat asid tetap merah sementara bakteria cepat bukan asid berwarna biru.
Apakah persamaan antara Gram Stain dan Acid Fast?
- Gram stain dan Acid fast adalah dua teknik pewarnaan berbeza.
- Kedua-dua teknik ini mengkategorikan bakteria kepada dua kumpulan.
- Kedua-dua teknik menggunakan dua noda dan satu pewarnaan.
Apakah Perbezaan Antara Gram Stain dan Acid Fast?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Gram Stain vs Acid Fast |
|
Pewarnaan gram adalah teknik pewarnaan berbeza, yang memisahkan bakteria menjadi dua kumpulan bakteria Gram-positif dan bakteria Gram-negatif. | Acid Fast stain adalah noda pembezaan yang digunakan untuk mengenal pasti organisma cepat asid dari organisma cepat tidak asid. |
Noda Utama | |
Crystal violet adalah noda primer yang biasa digunakan dalam pewarnaan gram. | Carbol fuchsin adalah noda utama yang digunakan dalam asid cepat. |
Ejen Decolourizing | |
95% alkohol digunakan sebagai agen penyahwarnaan dalam noda gram. | Alkohol asid digunakan sebagai agen penyahwarna dalam asid cepat. |
Noda Kaunter | |
Noda gram menggunakan safranin sebagai noda pembanding. | Noda cepat asid menggunakan biru metilena sebagai noda pembanding. |
Pemerhatian | |
Bakteria gram negatif diperhatikan dalam warna pilih dan bakteria gram positif diperhatikan dalam warna ungu. | Bakteria Asid cepat diperhatikan dalam warna merah dan bakteria cepat bukan asid diperhatikan dalam warna biru. |
Ringkasan - Gram Stain vs Acid Fast
Visualisasi mikroorganisma dalam keadaan hidup sukar. Oleh itu, prosedur pencemaran dan pewarnaan biologi digunakan secara meluas untuk mengkaji sifatnya. Pewarnaan berbeza adalah salah satu jenis teknik pewarnaan yang digunakan untuk membezakan bakteria. Noda gram dan noda cepat asid adalah dua teknik pewarnaan berbeza. Pewarnaan gram membezakan bakteria gram negatif dan bakteria gram positif berdasarkan ketebalan dinding sel mereka. Pewarnaan asid cepat membezakan bakteria cepat asid daripada bakteria cepat bukan asid berdasarkan kandungan asid mikolik di dinding sel. Inilah perbezaan antara asid cepat dan noda gram.
Muat turun Versi PDF Gram Stain vs Acid Fast
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam catatan petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan antara Gram Stain dan Acid Fast.