Perbezaan Utama - Marker Pilihan vs Gene Reporter
Teknik kejuruteraan genetik digunakan untuk memindahkan gen penting dari organisma ke organisma lain. Memasukkan gen asing ke dalam genom organisma lain dan membuatnya dinyatakan dalam sel inang adalah langkah paling sukar dalam pemindahan gen. Untuk mengesan kejayaan proses transformasi, penanda yang dipilih dan gen pelapor digunakan dalam molekul rekombinan. Penanda yang boleh dipilih adalah urutan DNA atau gen yang mengekspresikan dan memilih sel yang diubah dari sel yang tidak diubah. Gen pelapor adalah gen lain yang digunakan untuk membezakan sel yang diubah dan untuk mengukur atau mengesan bagaimana gen yang dimasukkan berfungsi dalam inang. Perbezaan utama antara penanda yang dipilih dan gen pelapor adalah bahawa penanda yang dipilih digunakan untuk menyaring sel-sel yang tidak diubah dan untuk memberi isyarat kepada sel-sel yang diubah sementara gen pelapor digunakan untuk mengukur tahap ekspresi gen di dalam tuan rumah.
KANDUNGAN
1. Gambaran Keseluruhan dan Perbezaan Utama
2. Apa itu Marker yang Boleh Dipilih
3. Apa itu Gene Reporter
4. Perbandingan Berdampingan - Marker yang Boleh Dipilih vs Gene Reporter
5. Ringkasan
Apakah Penanda Yang Boleh Dipilih?
Dalam kejuruteraan genetik, gen minat dimasukkan ke dalam vektor yang sesuai dan diubah menjadi organisma inang. Walau bagaimanapun, transformasi hanya berjaya dalam sel inang yang kompeten, dan ada kemungkinan sel inang menolak pengambilan DNA asing. Oleh itu, pembezaan sel yang diubah dan yang tidak diubah adalah penting untuk meneruskan percubaan selanjutnya. Oleh itu, penyelidik memasukkan gen penanda yang boleh dipilih ke vektor untuk pemilihan sel yang diubah dari sel yang tidak diubah dengan mudah. Penanda yang boleh dipilih adalah urutan DNA, terutamanya gen yang berguna untuk mengenal pasti sel yang diubah. Gen penanda ini menunjukkan sifat yang sesuai dengan pemilihan buatan sel yang diubah dari sel yang tidak diubah pada media.
Penanda terpilih yang paling biasa digunakan dalam biologi molekul adalah gen tahan antibiotik. Gen tahan antibiotik dimasukkan ke dalam vektor dan diubah menjadi sel inang terutamanya ke bakteria inang. Antibiotik tertentu dimasukkan ke dalam medium pembiakan bakteria. Kerana adanya penanda selektif, di bawah keadaan selektif, hanya sel yang mengandungi penanda terpilih yang sesuai dapat bertahan. Sel yang tidak diubah tidak dapat tumbuh dalam medium yang mengandungi antibiotik. Oleh itu, kerana penanda yang boleh dipilih yang tahan terhadap antibiotik, sel yang diubah dapat dikenal pasti dengan mudah.
Gen yang memberikan sifat antimetabolit, racun herba digunakan sebagai penanda selektif dalam vektor pengklonan dalam kejuruteraan genetik tumbuhan. Walau bagaimanapun, transformasi penanda selektif ini menjadi organisma yang diubahsuai secara genetik mempunyai kesan negatif terhadap persekitaran dan manusia. Pelepasan bakteria tahan antibiotik dapat meningkatkan daya tahan antibiotik patogen manusia. Ia boleh mencemarkan produk atau biojisim oleh antibiotik dan dapat kehilangan tekanan selektif akibat penurunan dan ketidakaktifan antibiotik.
Gambar 01: Vektor plasmid untuk pemindahan gen dengan penanda yang boleh dipilih
Apa itu Gene Reporter?
Gen pelapor adalah gen yang memungkinkan pengesanan atau pengukuran ekspresi gen yang dimasukkan. Gen pelapor ini boleh dilampirkan pada urutan gen gen yang berminat untuk menandakan lokasi atau tahap ekspresi. Oleh itu, semasa ekspresi gen di bawah pendorong yang sama, mereka ditranskripsikan ke dalam urutan mRNA tunggal dan kemudian diterjemahkan ke dalam protein yang dapat menunjukkan tahap ekspresi gen.
Gen pelapor terdiri dari pelbagai jenis, dan ia mengandungi ciri-ciri yang dapat dikenali secara visual yang biasanya terlibat dalam protein pendarfluor dan cahaya. Gen yang mengekod protein dan enzim pendarfluor, mengubah substrat yang tidak kelihatan menjadi produk bercahaya atau berwarna dengan memberi isyarat ekspresi gen yang berjaya dan memberi peluang untuk pengukuran ekspresi gen.
Gambar 02: Ekspresi Gene Reporter
Apakah perbezaan antara Marker yang Boleh Dipilih dan Gene Reporter?
Artikel Diff Tengah sebelum Jadual
Marker yang boleh dipilih vs Gene Reporter |
|
| Penanda yang boleh dipilih adalah sejenis urutan DNA yang membantu membezakan sel yang berubah dengan sel yang tidak berubah. | Gen pemberita adalah gen yang membantu mengukur kuantiti ekspresi gen yang diinginkan yang dimasukkan ke dalam sel inang. |
| Sifat Unit Yang Dihasilkan | |
| Gen dikodkan dengan ciri-ciri yang membantu dalam pemilihan buatan pada media yang sedang berkembang. | Gen dikodkan dengan ciri yang dapat dilihat secara visual. |
| Penggunaan | |
| Gen ketahanan antibiotik, gen antimetabolit, gen tahan racun herba, dan lain-lain adalah contoh untuk penanda yang boleh dipilih. | Kod gen untuk protein pendarfluor hijau, β-glukuronidase, Chloramphenicol acetyltransferase, protein pendarfluor merah, dan lain-lain adalah contoh. |
Ringkasan - Marker Pilihan vs Gene Reporter
Penanda yang dipilih membolehkan sel yang diubah tumbuh dalam media selektif yang diberi antibiotik atau racun herba tertentu. Mereka digunakan untuk pemilihan awal sel yang diubah. Gen pelapor digunakan untuk mengukur tahap ekspresi gen yang diinginkan yang dimasukkan. Mereka juga membenarkan pembezaan sel yang berubah dan tidak berubah. Ini adalah perbezaan antara gen penanda dan gen pemberita. Kedua-dua gen penanda dan pelapor yang dipilih dianggap sebagai penanda penting dalam kejuruteraan genetik.
